厭氧培養(yǎng)箱氧氣是如何置換的
上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司介紹：厭氧培養(yǎng)箱通過氮?dú)庵脫Q、混合氣體置換、催化除氧三步法實(shí)現(xiàn)氧氣置換，具體操作如下：
一、氮?dú)庵脫Q：初步降低氧氣濃度
- 密封與準(zhǔn)備
- 放置必要附件（如離心機(jī)、培養(yǎng)皿）和干燥劑（如分子篩干燥劑）于操作室內(nèi)，并放入?yún)捬踔甘緞ㄈ缑捞m指示紙）。
- 密封手套：將乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊，防止氣體泄漏。
- 抽真空校驗(yàn)：關(guān)閉取樣室內(nèi)外門，抽真空至壓力低于0.06MPa（或500毫米汞柱），驗(yàn)證氣密性。
- 氮?dú)獬淙肱c排放
- 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y，使手套鼓起后關(guān)閉閥門，扎緊袋口。
- 將氮?dú)饩徛尫胖敛僮魇覂?nèi)，重復(fù)此過程至少2次，每次充氮前需對取樣室抽真空，并用腳踏開關(guān)開閉排氣閥，確保氧氣濃度初步降低。
二、混合氣體置換：進(jìn)一步消除殘留氧氣
- 混合氣體配比
- 混合氣體通常由氮?dú)猓∟?，85%-90%）、氫氣（H?，5%-10%）和二氧化碳（CO?，5%）組成。
- 氮?dú)庾鳛槎栊詺怏w提供無氧環(huán)境；氫氣與殘留氧氣在催化劑作用下反應(yīng)生成水；二氧化碳維持適宜pH，模擬厭氧菌自然生存環(huán)境。
- 充入與流量控制
- 調(diào)換氣路，打開混合氣體閥進(jìn)氣，充氣時(shí)取樣室需先抽真空，并隨時(shí)用腳踏開關(guān)開閉排氣閥。
- 混合氣體充滿塑料袋后，關(guān)閉直通閥，打開流量計(jì)閥門，調(diào)整流量至每分鐘10ml左右。
- 重復(fù)混合氣體置換2-3次，確保操作室內(nèi)氣體含氧量降至極微量狀態(tài)（通常低于0.1%）。
三、催化除氧：徹底消除痕量氧氣
- 催化劑作用
2H2?+O2?鈀催化劑?2H2?O
- 催化反應(yīng)持續(xù)1小時(shí)后，觀察美蘭指示紙顏色變化。若指示紙不變色（保持無色或淺藍(lán)色），表明操作室內(nèi)已達(dá)到厭氧環(huán)境（氧氣濃度低于檢測限）。
- 滅菌與維護(hù)
- 開啟紫外線燈對操作室進(jìn)行滅菌處理，滅菌時(shí)間根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求自定（通常15-30分鐘）。
- 連續(xù)使用厭氧培養(yǎng)箱時(shí)，需定期檢查和補(bǔ)充除氧劑（如鈀粒）和干燥劑，確保室內(nèi)厭氧條件的維持。
- 長期實(shí)驗(yàn)需每天觀察厭氧指示條，若變色則需重新?lián)Q氣；同時(shí)連續(xù)輸入微量混合氣體（流量約10ml/min），通過催化吸收補(bǔ)進(jìn)的微量氧氣，保證室內(nèi)厭氧狀態(tài)。
四、關(guān)鍵注意事項(xiàng)
- 氣體壓力控制
- 置換過程中需嚴(yán)格控制氣體輸入壓力（通常為0.1MPa左右），以防爆管或損壞設(shè)備。
- 取樣室充氮置換時(shí)，若選定真空度較低，需增加置換次數(shù)以確保氧氣徹底排除。
- 安全操作規(guī)范
- 氫氣具有爆炸性，需控制其濃度（通常<10%）并配備安全報(bào)警裝置。
- 調(diào)換氣瓶時(shí)需扎緊氣管，避免含氧氣體流入；真空泵需定期檢查加油，確保正常運(yùn)行。
- 環(huán)境適應(yīng)性
- 儀器應(yīng)安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方，避免外界環(huán)境干擾。
- 開機(jī)前需熟悉各配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確操作方法。
